少妇人妻偷人精品无码AV,大屁股熟女一区二区三区,亚洲AV无码成人精品区,三个男人躁我一个爽视频免费

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網(wǎng)站!
誠信促進發(fā)展,實力鑄就品牌
服務(wù)熱線:

18813176065

產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > inspiralis ——————超螺旋檢測

inspiralis ——————超螺旋檢測

發(fā)布時間: 2024-05-30  點擊次數(shù): 286次

DNA 旋轉(zhuǎn)酶是一種不一樣的拓撲異構(gòu)酶,因為它是能夠催化 DNA 負超螺旋的酶。該過程依賴于 ATP,通過雙鏈 DNA 的切割和重新連接以 2 步進行。

有關(guān)該反應(yīng)的概述,請參閱:McKie ,  SJ 、  Neuman,  KC和 Maxwell,  A.  ( 2021 )。DNA 拓撲異構(gòu)酶:通過結(jié)構(gòu)功能分析進一步了解細胞作用和多蛋白復(fù)合物。BioEssays  ,  43 ,e2000286。

典型反應(yīng)如下:

將 1 U DNA 促旋酶與 0.5 µg 松弛 pBR322 DNA 在 30 µl 反應(yīng)體系中在 1X 檢測緩沖液中于 37°C 下孵育 30 分鐘

通過添加 30 µl 氯仿/異戊醇 (24/1) 和 30 µl 終止緩沖液 (STEB:40% 蔗糖、100 mM Tris.HCl (pH 7.5)、100 mM EDTA、0.5 mg/ml 溴酚藍) 來終止每個反應(yīng),然后將其加載到瓊脂糖凝膠上。(0.8%-1.0%:w/v)

凝膠可以在 TBE(90 mM Tris.Borate、2 mM EDTA)或 TAE(40 mM Tris.Acetate、2 mM EDTA)中運行,但如果在 TAE 中以最高 90V 運行 2 - 3 小時,超螺旋 pBR322 的分辨率會好得多。

典型凝膠:

大腸桿菌促旋酶超螺旋

所用的 DNA 底物(本例中為松弛的 pBR322)通常由瓊脂糖凝膠上的一系列條帶組成。這些條帶是拓撲異構(gòu)體(具有不同連接數(shù)的 DNA)。

用 DNA 促旋酶處理松弛的 pBR322 可將松弛的拓撲異構(gòu)體轉(zhuǎn)化為質(zhì)粒的超螺旋形式,后者在瓊脂糖凝膠上遷移速度更快。還可以看到上部條帶,這是開環(huán)(有缺口)DNA,它存在于松弛的基質(zhì)中,但與一些松弛的拓撲異構(gòu)體一起遷移。

嵌入劑

如果凝膠槽中存在溴化乙錠或氯喹等污染物,則檢測可能會出現(xiàn)問題。這些化學(xué)物質(zhì)是嵌入劑,會影響 DNA 的移動性,導(dǎo)致結(jié)果混亂。如果緩沖液中存在嵌入劑,則松弛的拓撲異構(gòu)體會提高移動性,并大致在與負超螺旋質(zhì)粒相同的位置運行。根據(jù)嵌入劑的量,負超螺旋 DNA 的移動性可能略低于正常水平。

核酸酶

如果檢測中存在污染性核酸酶(由于檢測緩沖液被污染或細胞表達的不純級分),切口可能會顯著增加,從而導(dǎo)致開環(huán) DNA 的數(shù)量增加,并可能產(chǎn)生線性 DNA。這在 OC 和 SC 之間以單一帶的形式運行。

ATP

之前活性酶的活性喪失可能是由于緩沖液中 ATP 的劣化所致,盡管 5X 檢測緩沖液已被開發(fā)以盡量減少這種情況。如果發(fā)生活性喪失,則在反應(yīng)中添加額外的 ATP 將克服該問題。

 


北京和一生物科技有限公司專業(yè)代理antibodiesinc全系列產(chǎn)品,專營進口生物試劑,科學(xué)儀器,實驗消耗品,化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國外品牌簽下代理,sigmasanta、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegendebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等,能為廣大科研用戶提供數(shù)萬種試劑、儀器和實驗消耗品。

我們公司的優(yōu)勢:

1:與500多家公司合作,基本什么品牌都能進口,包括血清,抗體,耗材,還有部分限制進口的

2:部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,物流穩(wěn)定

3:一手貨源,價格價格優(yōu),售后齊全,歡迎新老客戶咨詢訂購

 

聯(lián)


亚洲国产精华液2020| 高H纯肉大尺度调教PLAY| 人妻大战黑人白浆狂泄| 色婷婷五月综合中文字幕| 中文在线А√天堂| 69丰满少妇AV无码区| 无码人妻AV免费一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽人人精品| 玖玖热麻豆国产精品视频| 被体育老师抱着C到高潮| 免费视频成人片在线观看| 阿娇被躁120分钟视频| 女人与拘做受全过程免费视频 | 男男开小嫩苞好深啊H窑子开| 少妇被粗大猛进去69影院| 正在播放老肥熟妇露脸| 两个奶被男人揉了一个晚上| 极品妇女扒开粉嫩小泬| 打屁股羞耻扒开撅着| 特级毛片绝黄A片免费播冫| 亚洲AV成人片无码网站网| 99久久无码一区人妻A片| 精品久久久无码中文字幕| 欧美VPSWINDOWS另类| 久久久久久曰本AV免费免费| 精品国产乱码久久久人妻| 又湿又紧又大又爽A视频| 国产精品亚洲一区二区三区| 成人免费ā片在线观看| 高冷受做到失禁颤抖哭着求饶| 人妻少妇69式99偷拍| 久久久久久久久久久精品尤物 | 夜夜添无码一区二区三区| HD女人奶水授乳MILK| 国产精品毛片AV一区二区三区 | 与六十五老妇做爰| 国产精品久久久久精品三级卜| 精品成A人无码亚洲成A按摩| 中文字幕无码毛片免费看| 天天综合天天做天天综合| 久久久噜噜噜久久中文字幕色伊伊|